Domov > Blog > Správy z priemyslu

Aké sú funkcie súpravy ELISA?

2022-12-23

Súprava ELISA je založená na pevnej fáze antigénu alebo protilátky a enzýmovom značení antigénu alebo protilátky. Antigén alebo protilátka naviazaná na povrch pevného nosiča si stále zachováva svoju imunologickú aktivitu a enzýmom značený antigén alebo protilátka si zachováva svoju imunologickú aktivitu aj aktivitu enzýmu. V čase stanovenia testovaná vzorka (v ktorej sa meria protilátka alebo antigén) reaguje s antigénom alebo protilátkou na povrchu pevného nosiča. Komplex antigén-protilátka vytvorený na pevnom nosiči sa oddelí od ostatných látok v kvapaline premytím.

Pridávajú sa enzýmom značené antigény alebo protilátky, ktoré sa tiež reakciou viažu na pevný nosič. V tomto čase je množstvo enzýmu v tuhej fáze úmerné množstvu látky vo vzorke. Po pridaní substrátu enzýmovej reakcie je substrát katalyzovaný enzýmom, aby sa zmenil na farebné produkty. Množstvo produktu priamo súvisí s množstvom testovanej látky vo vzorke, preto je možné vykonať kvalitatívnu alebo kvantitatívnu analýzu podľa hĺbky farby.

Vysoká katalytická účinnosť enzýmov nepriamo zosilňuje výsledky imunitnej odpovede, vďaka čomu je test vysoko citlivý. ELISA sa môže použiť na stanovenie antigénov, ale môže sa použiť aj na stanovenie protilátok.

Základné princípy súpravy ELISA
Využíva špecifickú reakciu antigénu a protilátky na spojenie predmetu s enzýmom a potom vytvára farebnú reakciu medzi enzýmom a substrátom na kvantitatívne stanovenie. Predmetom merania môže byť protilátka alebo antigén.

Pri tejto metóde stanovenia sú potrebné tri činidlá:
â  Antigén alebo protilátka v pevnej fáze (imunitný adsorbent)
â¡ Enzýmom označený antigén alebo protilátka (marker)
⢠substrát pre pôsobenie enzýmov (činidlo vyvolávajúce farbu)

Pri meraní sa najprv antigén (protilátka) naviaže na pevný nosič, ale stále si zachováva svoju imunitnú aktivitu a potom sa pridá konjugát (marker) protilátky (antigénu) a enzýmu, ktorý si stále zachováva svoju pôvodnú imunitnú aktivitu a enzým. činnosť. Keď konjugát reaguje s antigénom (protilátkou) na pevnom nosiči, pridá sa zodpovedajúci substrát enzýmu. Teda katalytická hydrolýza alebo REDOXNÁ reakcia a farba.

Odtieň farby, ktorú produkuje, je úmerný množstvu antigénu (protilátky), ktorý sa má merať. Tento farebný produkt je možné pozorovať voľným okom, optickým mikroskopom, elektrónovým mikroskopom, možno tiež merať spektrofotometrom (prístroj na označovanie enzýmov). Metóda je jednoduchá, pohodlná, rýchla a špecifická.

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept