> Blog > Správy z priemyslu

Prečo bunková kultúra najskôr lýzuje červené krvinky?

2022-12-23

Základný úvod
Lyzát erytrocytov je jednou z najjednoduchších a najjednoduchších metód odstraňovania červených krviniek, to znamená štiepenia červených krviniek lyzátom, ktorý nepoškodzuje bunky s jadrami a dokáže úplne odstrániť červené krvinky. Štiepenie lyzátu je mierna metóda odstraňovania červených krviniek, ktorá sa používa hlavne na separáciu a čistenie tkanivových buniek rozptýlených enzýmovým štiepením, separáciu a čistenie lymfocytov a odstraňovanie červených krviniek pri experimentoch s tkanivovým proteínom a jadrom. extrakcia kyselinou. Tkanivové bunky získané lyzátom červených krviniek neobsahujú červené krvinky a možno ich ďalej použiť na primárnu kultiváciu, bunkovú fúziu, prietokovú cytometriu, separáciu a extrakciu nukleovej kyseliny a proteínu atď.

Inštrukcie na používanie
Vzorka tkanivových buniek
1. Čerstvé tkanivá boli štiepené pankreasom/enzýmom alebo kolagenázou a dispergované v suspenzii jednotlivých buniek a supernatant bol odstránený centrifugáciou.

2. Vyberte ELS lyzát z chladničky pri 4, pridajte ELS lyzát k bunkovej zrazenine v pomere 1:3-5 (pridajte 3-5ml lyzátu na 1ml zhutnených buniek), jemne prefúknite a premiešajte.

3. Odstreďujte pri 800-1000 ot./min. počas 5-8 minút a zlikvidujte hornú červenú číra kvapalinu.

4. Vyzrážaná časť sa zhromaždila a odstredila s Hankovým roztokom alebo kultivačným roztokom bez séra 2-3 krát.

5, ak praskanie nie je úplné/kompletné, možno zopakovať kroky 2 a 3.

6. Resuspenzné bunky pre nasledujúce experimenty; Ak sa RNA extrahuje, najlepšie je to urobiť v roztoku pripravenom v kroku 4 s použitím DEPC vody

Červené krvinky majú veľmi krátky životný cyklus, len 120 dní, ale veľmi rýchlo reprodukujú krv a v tomto prípade sú obzvlášť schopné bunkového delenia a sú to bunky, ktoré sa delia najrýchlejšie zo všetkých, takže táto bunka je veľmi cenná, takže je to veľmi užitočné pre bunkovú kultúru. Je to veľmi jednoduché, nemá v sebe žiadne organely, len bunkové membrány a bielkoviny.

Predchádzajúce:Aké sú funkcie súpravy ELISA?

Ďalšie:Požiadavky na činidlá a základné znázornenie koncentrácie roztoku.